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生物制药中常见的消毒灭菌除菌器使用方法
发布时间：2014-06-11 浏览次数：7879 分享：
微生物广泛存在于周围环境中，其中有些又是病原微生物，从预防感染出发，医务工作者必须严格执行无菌操作，对所用的物品和工作环境进行消毒灭菌，确保医疗与科研正常进行。消毒灭菌主要是通过理化因素使微生物的主要代谢发生障碍，或菌体蛋白质变性凝固，或破坏其遗传物质，导致微生物死亡。这里主要介绍物理因素杀灭微生物的几种方法，以及相关器材的使用。
(一)高压蒸汽灭菌器
蒸汽灭菌器构造
高压蒸汽灭菌器是一个双层的金属圆筒，两层之间盛水，外层坚固厚实，其上方有金属厚盖，盖旁附有螺旋，借以紧闭盖门，使蒸汽不能外溢，因而蒸汽压力升高，随着其温度亦相应地增高。
高压蒸汽灭菌器上装有排气阀门、安全活塞，以调节蒸汽压力。有温度计及压力表，以表示内部的温度和压力。灭菌器内装有带孔的金属搁板，用以放置要灭菌物体。
蒸汽灭菌器用法方法
加水至外筒内，被灭菌物品放入内筒。盖上灭菌器盖，拧紧螺旋使之密闭。灭菌器下用煤气或电炉等加热，同时打开排气阀门，排净其中冷空气，否则压力表上所示压力并非全部是蒸汽压力，灭菌将不完全。
待冷空气全部排出后(即水蒸气从排气阀中连续排出时)，关闭排气阀。继续加热，待压力表渐渐升至所需压力时(一般是101.53 kPa，即15磅/英寸2，温度为121.3℃)，调解炉火，保持压力和温度(注意压力不要过大，以免发生意外)，维持15~30 min。灭菌时间到达后，停止加热，待压力降至零时，慢慢打开排气阀，排除余气，开盖取物。切不可在压力尚未降低为零时突然打开排气阀门，以免灭菌器中液体喷出。
高压蒸汽灭菌法为湿热灭菌法，其优点有三：一湿热灭菌时菌体蛋白容易变性，二湿热穿透力强，三蒸气变成水时可放出大量热增强杀菌效果，因此，它是效果最好的灭菌方法。凡耐高温和潮湿的物品，如培养基、生理盐水、衣服、纱布、棉花、敷料、玻璃器材、传染性污物等都可应用本法灭菌。
目前出现的便携式全自动电热高压蒸汽灭菌器，操作简单，使用安全。
(二)干热灭菌器(烤箱)
干热灭菌器构造
干热灭菌器是由双层铁板制成的方形金属箱，外壁内层装有隔热的石棉板。箱底下放置大型火炉，或在箱壁中装置电热线圈。内壁上有数个孔，供流通空气用。箱前有铁门及玻璃门，箱内有金属箱板架数层。电热烤箱的前下方装有温度调节器，可以保持所需的温度。
干热灭菌器用法方法
将培养皿、吸管、试管等玻璃器材包装后放入箱内，闭门加热。当温度上升至160～170℃时，保持温度2 h，到达时间后，停止加热，待温度自然下降至40℃以下，方可开门取物，否则冷空气突然进入，易引起玻璃炸裂;且热空气外溢，往往会灼伤取物者的皮肤。一般吸管、试管、培养皿、凡士林、液体石蜡等均可用本法灭菌。
(三)电热恒温鼓风干燥箱
恒温干燥箱特点
1.工作室采用优质钢板或不锈钢板。
2.微电脑智慧控温仪，具有设定，测定温度双数字显、带数字定时 器，定时范围 ：0~9999 min 。 带加热功率调节功能，垂直强迫对流、功率抑制和自整定功能 , 确保干燥箱运行过程的温度精度和稳定性.
3.采用高精度传感器，误差小，温度控制准确性高。
4.鼓风电机德国原装进口，耐高温耐高湿，噪音低，摆动幅度小，有利于保证干燥箱内温度均一。
恒温干燥箱优势
1.全不锈钢内腔，无需任何工具即可方便拆卸内搁板，便于清洗。
2.内胆内圆角，减少了不必要的内表面面积，从而减少了细菌污染机率，更于快速有效地清洁内壁。
3.热风循环系统由低噪声风机和风道组成，工作室内温度均匀。
4.配备钢化玻璃窗，便于观察样品。
(四)除菌滤器
除菌滤器简称滤菌器。种类很多，孔径非常小，能阻挡细菌通过。它们可用陶瓷、硅藻土、石棉或玻璃屑等制成。下面介绍几种常用的滤菌器。
滤菌器构造
①赛氏滤菌器：由三部分组成。上部的金属圆筒，用以盛装将要滤过的液体;下部的金属托盘及漏斗，用以接受滤出的液体;上下两部分中间放石棉滤板，滤板按孔径大小可分为三种：K滤孔最大，供澄清液体之用;EK滤孔较小，供滤过除菌;EK-S滤孔更小，可阻止一部分较大的病毒通过。滤板依靠侧面附带的紧固螺旋拧紧固定。
②玻璃滤菌器：由玻璃制成。滤板采用细玻璃砂在一定高温下加压制成。孔径由0.15～250 μm不等，分为G1、G2、G3、G4、G5、G6六种规格，后两种规格均能阻挡细菌通过。
③薄膜滤菌器：由塑料制成。滤菌器薄膜采用优质纤维滤纸，用一定工艺加压制成。孔径：200 nm，能阻挡细菌通过。
滤菌器用法
将清洁的滤菌器(赛氏滤菌器和薄膜滤菌器须先将石棉板或滤菌薄膜放好，拧牢螺旋)和滤瓶分别用纸或布包装好，用高压蒸汽灭菌器灭菌。再以无菌操作把滤菌器与滤瓶装好，并使滤瓶的侧管与缓冲瓶相连，再使缓冲瓶与抽气机相连。将待滤液体倒入滤菌器内，开动抽气机使滤瓶中压力减低，滤液则徐徐流入滤瓶中。滤毕，迅速按无菌操作将滤瓶中的滤液放到无菌容器内保存。滤器经高压灭菌后，洗净备用。
滤菌器用途
用于除去混杂在不耐热液体(如血清、腹水、糖溶液、某些药物等)中的细菌。
(五)紫外线灯的使用
紫外线中波长为240～280 nm者具有杀菌能力，其中265～266 nm的杀菌作用最强。医学上常使用紫外线灯产生紫外线进行消毒灭菌。常用的是水银灯，灯管由石英玻璃制成，管内充满压强为266 Pa的氩和几滴水银。其杀菌作用主要是因为DNA吸收了紫外线引起胸腺嘧啶形成二聚体，从而干扰了DNA的复制，轻则发生突变，重则导致死亡。紫外线杀菌力强而稳定，但穿透力弱，不能透过普通玻璃和有色纸张，因此，只适用于直接照射的物体表面消毒或空气消毒。
紫外线灭菌使用方法
将涂有细菌的平皿放置在距紫外线60～100 cm处，直接受紫外线照射30 min后，37℃孵育24h后观察生长情况。
(六)红外线接种环灭菌器
红外线接种环灭菌器用途
接种环、接种针、小镊子、小剪刀等最新高温灭菌设备。其没有明火，不产生乱流，是生物安全柜的必备小型灭菌设备。
红外线接种环灭菌器原理
需消毒的物品通过置入温度高达900℃的高效陶瓷红外线加热管中，经过5～7秒的高温灼烧，从而达到灭菌效果。
红外线接种环灭菌器特点
1.采用微电脑智能控温仪，具备自整定PID技术，控温准确，响应速度快，可根据实验要求设定灭菌温度;由于采用控温功能，当温度达到设定温度时会自动停止对加热管工作，这种间断式的加热方式，不会使加热管全程全功率工作，可以让它的使用寿命延长一倍;有温度表显示当前温度值，可以更直观地把握灭菌温度，而不用担心灭菌不充分的情况。
2.体积小，重量轻，操作简便;安全方便，无明火操作，加热组件采用高效陶瓷红外线加热管，升温快，温度高，使用寿命长。
3.可快速消毒小型器械，不受外界因素的影响，可提高实验的工作效率，能适应各种实验环境。
4.主体采用304不锈钢制造，耐腐蚀、美观、易于清洁。
