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HKE372 SaCas9 Nuclease（核酸酶）
编号：HKE372
规格：50μg/盒
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编号：SR0310
规格：10支/盒
产品名称：SaCas9 Nuclease
中文名称：SaCas9 核酸酶
产品编号与包装规格：
| 编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 价格 |
| HKE372 | SaCas9 Nuclease | 50μg/盒 | crispr基因编辑（核酸酶） | 1365 |
产品描述：
CRISPR/Cas9 是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。CRISPR/Cas9 系统将入侵噬菌体和质粒 DNA 的片段整合到 CRISPR 序列中，并利用相应的 CRISPR RNAs（crRNAs）来指导 Cas9 蛋白对同源序列的降解，从而提高免疫性。人工改造过的 Cas9/sgRNA 系统通过 sgRNA（short guide RNA）引导 Cas9 蛋白 识别并剪切带有 sgRNA 靶点的双链 DNA，可用于基因敲除和精确编辑 DNA 等操作。
SaCas9 Nuclease 识别 5'-NNGRRT-3' PAM 序列，较长的 PAM序列具有更高的特异性。此外，该酶蛋白分子量相对于 SpCas9 较小，在电转时具有更高的转化效率。本产品提供的 Cas9 核酸内切酶通过在蛋白两端加了核定位信号（NLS），可使蛋白进入细胞核内进行基因组编辑。
产品特点：可显著降低脱靶效应； 纯蛋白体系，避免 CRISPR 基因敲除时引入质粒或病毒干扰。
产品用途：
1，基于蛋白与 sgRNA 转染的非病毒载体 CRISPR 基因敲除；
2，基于蛋白与 sgRNA 转染的非病毒载体 CRISPR 基因敲入；
3，sgRNA 剪切靶点 DNA 效率检测，降低体内筛选成本；
4，体外剪切靶 DNA 的特异位点。
应用实例：图例）SaCas9 Nuclease 做 DNA 片段切割活性检测：
带有靶位点的DNA 片段为 1500bp，酶切后的片段为 1000bp 和 500bp。
保存温度：-20℃保存，或-80℃长期保存。
SaCas9 Nuclease 产品包装（A包装）：
| 产品组成 | 体积 |
| SaCas9 Nuclease(1μg/μl) | 50 μL |
| 10× SaCas9 Reaction Buffer | 500μl |
保存体系：20mM HEPES，500mM KCl，0.1Mm DTT，1%Sucrose，PH7.5，25℃。
质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE 胶检测仅可见清晰单一的目的条带，纯度达 95%；内毒素含量<100EU/mg；qPCR 方法检测无大肠杆菌基因组残留；无 RNase、核酸内、外切酶污染。
体外切割体系（20μL）：
| dsDNA | 200 ng |
| sgRNA | 200 ng |
| SaCas9 Nuclease | 0.2-1 ug |
| 10× SaCas9 Reaction Buffer | 2 μl |
| RNase Free Water | To 20 μl |
37 ℃保温 1 h、70℃保温 10 min
注：在反应体系中可添加 RNase Inhibitor 至 1U/μl，防止RNase 污染。
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| HKE366* | Cas9 D10A Nickase |
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| HKE368*** | Cas9(D10A,H840A) Nuclease |
| HKE369 | sgRNA In Vitro one-step Transcription Kit |
| HKE370 | sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit |
* 为 Cas9 D10A Nickase，能在与 sgRNA 靶序列互补的 DNA 链上产生切口，从而形成功能性的单链断裂，可以减少意外的脱靶基因修饰。
** 为 Cas9 H840A Nickase，能在与 sgRNA 靶序列非互补的DNA 链上产生切口，从而形成功能性的单链断裂，可以减少意外的脱靶基因修饰。
***为 Cas9(D10A,H840A) Nuclease，为 Cas9D10A，H840A 双突变失活酶，具有靶 DNA 结合活性，但无切割活性，可用于阴性对照等用途。
