金葡标准检验方法常见的难点
发布时间：2024-11-20 浏览次数：172
来源：澳门·威斯尼斯网站转载于“ 六扇门Study”公众号，作者~SIXDoors
前段时刻，某专业群有老师发了一张BP平板图
“哇，好漂亮的涂布板”
（图片来自网友分享）
由此引发了大家对金葡标准检验方法的讨论
1、怎么操作才能涂布出这么漂亮的板？
2、GB4789.10-2016版标准对金葡典型和可疑菌落的表述不清晰，新标准会如何修改？
BP板涂布操作技巧宝典
选择合适的稀释梯度，这个很关键，如果稀释梯度不够，菌落密集叠加，很难分开，上图如果菌落再少一半，就更完美了。
平板里倾注的BP培养基不能太薄，4mm较好。
使用微量移液枪将样品转移到平板上，控制样品的流量，使其不会溅出平板。
涂布时最好使用翘起顶端L棒，涂布更均匀。标准中要求涂布0.3，0.3，0.4，尽量不要涂0.4，平均成0.3，0.35，0.35，分布相对更平均一点，也更容易吸收。
涂布时尽量涂干，如果涂布后，液体吸收不好，可以放在洁净工作台上，继续吹五分钟就可以了。
冷藏过的平板需要恢复到室温后再使用，同时注意平板表面不能有冷凝水，免得影响涂布效果。最好一个一个培养皿摊开，恢复室温会比较快，否则叠放在一起，中间的平板可能会没有恢复到室温。
典型和可疑菌落的表述很重要
上图是2016版标准对BP平板上金黄色葡萄球菌典型菌落的描述，大家看看懵圈不？
首先，8.4.1对菌落的描述，这是典型菌落？还是可疑菌落？
描述的有“不透明沉淀环和清晰带”的算，没有的也算，到底啥样的算？
还是前半部分描述的是典型菌落，后半部分是可疑菌落？
其次，8.4.2先选择了典型菌落，然后8.4.3再从典型菌落里选择可疑菌落，谁告诉小六，到底怎么选？
结果计算的要求又是计算典型菌落，“可疑菌落”选出来是干啥用的？
8.4.2还说3个平板所有菌落数合计在20CFU~200CFU 之间的平板,计数典型菌落数；
第九章又说“典型菌落数在20CFU~200CFU 之间”，这前后表达也不一致啊！
典型和可疑菌落的表述很重要，与后面计数和确认时挑取菌落的选择原则有密切关系。
坊间传闻，GB4789.10启动修订
标准会修改Baird-Parker 平板菌落形态描述，提高标准适用性。建议增加一些典型图例，方便大家理解。
此外，新标准还计划修改以下内容：
（1）第一法定性检测，增加金黄色葡萄球菌显色平板法；
（2）第二法定量检测，增加“金黄色葡萄球菌测试片”初筛方法，提高检测效率，据说已经完成实验室内验证；
（3） 附录 B 增加金葡总肠毒素检测，优化肠毒素提取流程，据说是酶联免疫方法，可采用试剂盒或全自动酶联免疫设备进行检测，现在还在验证阶段；
（4）标准中增加“质控菌株”。
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