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金葡标准检验方法常见的难点

发布时间:2024-11-20    浏览次数:175

来源:澳门·威斯尼斯网站转载于“ 六扇门Study”公众号,作者~SIXDoors

前段时刻,某专业群有老师发了一张BP平板图

“哇,好漂亮的涂布板”

(图片来自网友分享)

由此引发了大家对金葡标准检验方法的讨论

1、怎么操作才能涂布出这么漂亮的板?

2、GB4789.10-2016版标准对金葡典型和可疑菌落的表述不清晰,新标准会如何修改?

BP板涂布操作技巧宝典

1


选择合适的稀释梯度,这个很关键,如果稀释梯度不够,菌落密集叠加,很难分开,上图如果菌落再少一半,就更完美了。

2


平板里倾注的BP培养基不能太薄,4mm较好。

3


使用微量移液枪将样品转移到平板上,控制样品的流量,使其不会溅出平板。

4


涂布时最好使用翘起顶端L棒,涂布更均匀。标准中要求涂布0.3,0.3,0.4,尽量不要涂0.4,平均成0.3,0.35,0.35,分布相对更平均一点,也更容易吸收。

5


涂布时尽量涂干,如果涂布后,液体吸收不好,可以放在洁净工作台上,继续吹五分钟就可以了。

6


冷藏过的平板需要恢复到室温后再使用,同时注意平板表面不能有冷凝水,免得影响涂布效果。最好一个一个培养皿摊开,恢复室温会比较快,否则叠放在一起,中间的平板可能会没有恢复到室温。

典型和可疑菌落的表述很重要

上图是2016版标准对BP平板上金黄色葡萄球菌典型菌落的描述,大家看看懵圈不?

首先,8.4.1对菌落的描述,这是典型菌落?还是可疑菌落?

描述的有“不透明沉淀环和清晰带”的算,没有的也算,到底啥样的算?

还是前半部分描述的是典型菌落,后半部分是可疑菌落?


其次,8.4.2先选择了典型菌落,然后8.4.3再从典型菌落里选择可疑菌落,谁告诉小六,到底怎么选?

结果计算的要求又是计算典型菌落,“可疑菌落”选出来是干啥用的?

8.4.2还说3个平板所有菌落数合计在20CFU~200CFU 之间的平板,计数典型菌落数;

第九章又说“典型菌落数在20CFU~200CFU 之间”,这前后表达也不一致啊!

 

典型和可疑菌落的表述很重要,与后面计数和确认时挑取菌落的选择原则有密切关系。

坊间传闻,GB4789.10启动修订

标准会修改Baird-Parker 平板菌落形态描述,提高标准适用性。建议增加一些典型图例,方便大家理解。


此外,新标准还计划修改以下内容:

(1)第一法定性检测,增加金黄色葡萄球菌显色平板法;

(2)第二法定量检测,增加“金黄色葡萄球菌测试片”初筛方法,提高检测效率,据说已经完成实验室内验证;

(3) 附录 B 增加金葡总肠毒素检测,优化肠毒素提取流程,据说是酶联免疫方法,可采用试剂盒或全自动酶联免疫设备进行检测,现在还在验证阶段;

(4)标准中增加“质控菌株”。

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