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唐菖蒲伯克霍尔德氏菌（椰毒假单胞菌酵米面亚种）检验解决方案
发布时间：2020-09-10 浏览次数：12809 分享：
今年8月，广东省一家肠粉店发生食物中毒，11名顾客吃了店内河粉后，出现呕吐、腹泻等症状，送医后1人抢救无效去世，2人病情较重，其余人员暂无生命危险。
经调查，这起食物中毒的罪魁祸首是“椰毒假单胞菌”，中毒原因是因为某些菌株可以产生一种叫“米酵菌酸”的毒素，一旦吃了含有这种毒素的食物，就会表现为恶心、呕吐、腹泻、头晕、全身无力，严重时会出现黄疸、肝肿大、皮下出血、呕血、惊厥抽搐等症状，最严重的会出现休克甚至死亡。
“椰毒假单胞菌”，全称椰毒假单胞酵米面亚种Pseudomonas cocovenenans subsp. Farinofermentans，是一种存在于酵米面、变质鲜银耳及其他淀粉类发酵产品中的食源性致病菌，
由于椰毒假单胞酵母菌酵米面亚种不是国际公开发表和承认的细菌分类科学名称，1999年划分为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌Burkholderia gladioli的一个病原型，目前现行标准GB/T 4789.29-2003《食品卫生微生物学检验 椰毒假单胞菌酵米面亚种检验》。2018年9月国家卫生健康委员会发布的《食品安全国家标准 食品微生物学检验 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌（椰毒假单胞菌酵米面亚种）检验（征求意见稿）》中，将该菌进行更名，同时新增分离培养基mPDA同PCFA用于唐菖蒲伯克霍尔德氏菌（椰毒假单胞菌酵米面亚种）的分离。
具体检验流程如下：
1. 检验流程（前增菌以及选择性分离过程）
2. 检验流程初筛实验
自选择性琼脂平板上分别挑取5个以上典型或可疑菌落，分区划线卵黄琼脂平板，36℃±1℃培养。挑取培养18～24 h的菌落进行革兰氏染色及氧化酶试验。对于革兰氏染色阴性、氧化酶试验阴性的菌继续培养至48 h±2 h，对于卵磷脂酶阳性，带有虹彩环的单个菌落，接种PDA平板，36℃±1℃培养24 h±2 h。
（澳门·威斯尼斯网站货号027162）卵黄琼脂（卵磷脂酶试验）
唐菖蒲伯克霍尔德氏菌恒温荧光扩增试剂盒快速检测法
1. 技术原理：利用两对特殊引物和具有链置换活性的BstDNA聚合酶，使模板两端引物结合处循环出现环状单链结构，引物顺利与模板结合并进行链置换扩增反应，实现在恒温条件下（60~65℃）进行连续快速扩增。反应加入显色指示剂，阴阳性结果显色差异显著，可直接通过颜色变化判读结果。
2. 产品优势
操作简便：简单加样操作，快速上手；
快速省时：获得菌液后1 h完成检测
灵敏度高：最低检测限8CFU。
特异性强：利用靶基因序列上的多个独立区域设计多条引物，保证扩增反应的高度特异性
结果简单可视：肉眼观察颜色，可判断结果。
“+”代表阳性；“-”代表阴性
3. 产品组分：
组分名称 规格×数量 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌检测试剂（冻干） 3排× 8管 复溶液 650 μL × 1管 阳性对照（冻干） 1管 阴性对照（冻干） 1管 裂解液 1 mL × 1管 显色指示剂 80 μL×1管 超纯水 1 mL×1管 说明书 1份
4. 过程图解：
5. 产品结果
“+”代表阳性；“-”代表阴性
相关产品信息
用途 | 产品编号 | 产品名称 | 包装规格 |
快速检验和鉴定 | KJD16L | 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌核酸快速检测试剂盒 核酸快速检测试剂盒 | 24测试/盒 |
选择性增菌 | 021055 | GVC增菌液 | 250g/瓶 |
分离培养 | 021054 | 改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基（mPDA） | 250g/瓶 |
021059 | PCFA培养基基础 | 250g/瓶 | |
SR0690 | PCFA培养基配套试剂 | 10支/盒 | |
卵磷脂酶试验 | 027161 | 卵黄琼脂基础（适应GB4789.29-2003） | 250g/瓶 |
卵磷脂酶试验 | 027162 | 卵黄琼脂基础（适应GB4789.29修订意见稿） | 250g/瓶 |
纯培养 | 021057 | 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 | 250g/瓶 |
形态观察 | 029010 | 革兰氏染色液 | 4种×10mL/盒 |
氧化酶试验 | 029172 | 氧化酶试剂 | 50测试/盒 |
动力试验和产毒素试验 | 021056 | 马铃薯葡萄糖半固体琼脂 | 250g/瓶 |
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