细菌新型生化鉴定管使用说明
―― 071830 霍乱弧菌生化鉴定盒(23种×5次)
(SN/T 1022-2010)
一)整套试剂及用品
鉴定生化反应的23种试剂(表1)、配套试剂各1瓶(靛基质试剂、无菌液体石蜡)、5瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、5支一次性无菌吸管。
二)西林瓶的使用方法
开启西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开铝盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞(如图1)。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
三)弧菌科生化鉴定盒的详细使用方法
霍乱弧菌为革兰氏阴性短小稍弯曲的杆菌,0.5-0.8×1.4-2.6μm,菌体一端有一条鞭毛,运动活泼。生长最适宜温度为35℃~38℃最适pH7.2~7.4,在pH6.0~9.2内可以生长,具有耐碱性。
挑取TCBS平板分离的可疑菌落进行革兰氏染色镜检,将疑是霍乱弧菌的菌落接种于T1N1琼脂上, 37±1℃培养18-24h,置于已配备的无菌生理盐水中,与0.5 McFarland的浊度管比浊,将菌悬液制备成0.5McFarland ( 约1×108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(约0.06mL)菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞,一般采用全加塞(如图2左两瓶所示),特殊情况在下表注明采用半加塞(如图2右两瓶所示),直立于内托的凹槽内(如图2),或放置于合适的瓶架中,于35-37℃培养箱中培养,结果观察见表1。
注意:如有特殊的接种方式、培养温度、时间或培养方式,请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
四)SN/T1022-2010霍乱弧菌生化鉴定特征见表2