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HKE378 NLS-Cas9(D10A,H840A) Nuclease（核酸酶）
编号：HKE378
规格：50μg/盒
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编号：023080
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编号：HKD028
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HKM细菌生化鉴定管(大盒生化鉴定管) 产品列表
编号：07系列
规格：种 × 次
产品名称：NLS-Cas9(D10A,H840A) Nuclease
中文名称：NLS-Cas9(D10A,H840A) 核酸酶
产品编号与包装规格：
| 编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 价格 |
| HKE378 | NLS-Cas9(D10A,H840A) Nuclease | 50μg/盒 | crispr基因编辑（核酸酶） | 1575 |
产品描述：
CRISPR/Cas9 是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统，改造后的 II 型 CRISPR/Cas9 系统在基因的定点修饰中展现出巨大的应用潜能。脱靶效应是目前 CRISPR/Cas9 技术应用 的一个难题，在基因编辑应用中，可能会出现难以预测的后果。
本制品是 spCas9 Nuclease 的一个突变体。Cas9 Nuclease 具有两个切割活性中心，从而实现在 sgRNA 靶序列特定位点引入 DNA 双链 断 裂 （ DSB ） 。 NLS-Cas9 (D10A,H840A) Nuclease 在 Cas9Nuclease 基础上突变两个切割活性中心，使其只具有靶 DNA 结合活 性，但无切割活性，并且通过在蛋白两端加了核定位信号（NLS），可使蛋白进入细胞核内发挥作用。
产品特点：纯蛋白体系，避免 CRISPR 基因敲除时引入质粒或病毒干扰；
保存体系：10mM Tris-HCl，300mM NaCl，0.1mM EDTA，50% Glycerol， PH7.4，25℃。
保存温度：-20℃保存，或-80℃长期保存。
NLS-Cas9(D10A,H840A) Nuclease 产品包装（A包装）：
| 产品组成 | 体积 |
| NLS-Cas9(D10A,H840A) Nuclease(0.1μg/μl) | 500 μL |
| 10×Reaction Buffer | 1 ml |
质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE 胶检测仅可见清晰单一的目的条带，纯度达 95%；内毒素含量< 0.1EU/μg；qPCR 方法检测无大肠杆菌基因组残留；无 RNase、核酸内、外切酶污染。
体外切割体系（20μL）：
| dsDNA | 200 ng |
| sgRNA | 200 ng |
| Cas9(D10A, H840A) Nuclease | 200ng |
| 10×Reaction Buffer | 2 μl |
| RNase Free Water | To 20 μl |
37 ℃保温 1 h、70℃保温 10 min
注：在反应体系中可添加 RNase Inhibitor 至 1U/μl，防止RNase 污染。
相关产品：
| HKE365 | NLS-Cas9 Nuclease |
| HKE366* | Cas9（D10A）Nickase |
| HKE367** | Cas9（H840A）Nickase |
| HKE369 | sgRNA In Vitro one-step Transcription Kit |
| HKE370 | sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit |
* 为 Cas9(D10A) Nickase，能在与 sgRNA 靶序列互补的 DNA 链上产生切口，从而形成功能性的单链断裂，可以减少意外的脱靶基因修饰。
** 为 Cas9(H840A) Nickase，能在 sgRNA 靶序列所在的DNA 链上产生切口，从而形成功能性的单链断裂，可以减少意外的脱靶基因修饰。
