产品名称:Easy Digestion T-vector(pED-T)
产品编号与包装规格:
编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 价格 |
HKT002-01B | Easy Digestion T-vector(pED-T) | 20次×5 | T载体 | 2398 |
产品描述:
Easy Digestion T-vector是一种PCR产物高效TA克隆的专 用T载体,它由pTZ19R 载体改造而成。Easy Digestion T- vector在插入位点两端特别设计了两个BamH I位点,使插入片 段可以用BamH I单酶切检测及亚克隆,另外还可以使用非常廉 价和高效的EcoR I与Hind III双酶切检测及亚克隆。
Easy Digestion T-vector 保留了pTZ19R 载体的所有功能: PCR 产物插入后可以利用 α-互补性进行蓝白斑筛选,挑选阳性 克隆;可以用M13F、M13R 通用引物对PCR 产物进行测序;含 有T7 RNA 聚合酶的启动子,可以对插入片段进行体外转录。
Easy Digestion T-vector(pED-T) 产品包装(A包装):
操作方法:
1) 选择合适的连接体系(详细介绍见背面)。
2) 取10μL 加入至 100μL 感受态细胞中,用移液 枪吹打混合,冰上放置30 分钟。
3) 将离心管置于 42℃水浴中,热击 60-90 秒,迅 速将离心管置于冰上,放置 2-3 分钟。
4) 向每个离心管中加入 500μL 无菌不含抗生素的 LB 或SOC 培养基中,37℃摇床,150rpm 振荡培养 45 分钟,使质粒上氨苄抗性基因表达,菌体复苏。
5) 吸取200μL 已转化的感受态细胞,加到含氨苄 青霉素的 LB 或SOC 固体平板上,用无菌涂布棒将细 胞均匀涂开,将平板置于 37℃培养箱里直至液体完全 吸收,倒置培养 12-16 小时。
6) PCR检测,利用试剂盒自带的高速PCR扩增试 剂2×FastTaq Mast Mix直接进行菌落PCR鉴定。