最近浏览
-
Fast Pfu DNA Polymerase（货号：HKE031-02A | 规格：250U）
编号：HKE031-02A
规格：250U
-
精氨酸支原体肉汤培养基（干粉）
编号：MP01BP
规格：250g/瓶
-
026905D 改良克氏双糖铁斜面 10mL×20支
编号：026905D
规格：10mL×20支/盒
-
022021P1 营养琼脂颗粒(20版药典) 250g/瓶
编号：022021P1
规格：250g/瓶
-
CP0251 甘露醇氯化钠琼脂平板 即用成品 90mm
编号：CP0251
规格：90mm×20个/盒
-
10%氯化钠胰蛋白胨大豆肉汤 10mL×20支/盒
编号：CP0690G
规格：10mL×20支/盒
产品名称：Fast Pfu DNA Polymerase
中文名称：快速Pfu DNA聚合酶
产品编号与包装规格：
| 编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 产品价格 |
| HKE031-02A | Fast Pfu DNA Polymerase | 250U | 快速Pfu DNA聚合酶 |
产品描述：本制品是通过采用分子进化技术对普通Pfu酶进行改造而获得的 新型Fast Pfu酶，是新一代的高保真DNA聚合酶。该酶解决了高保真PCR反应中Pfu酶扩增灵敏度低、延伸速度缓慢的难题，能够高效、快速扩增≤6kb片段目的基因片段（最长可达20kb），模板低至0.05ng， 并且在DNA末端补平、全基因合成、引入突变等之中有着很好的应用。
产品特点：
高保真：保真度高于Pfu酶，为普通Taq酶的50倍。
快速高效：Fast Pfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍，72℃保温30秒可延伸1kb以上。扩增长度可达20kb，能高效扩增≤6kb片段。
高灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出1.2kb特定基因片段，扩增性能显著优于普通Pfu酶。
独特配方的 5×Buffer：使PCR 扩增反应更加稳定、灵敏、高效。
产品用途：用于要求保真度比较高的PCR反应，包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成、DNA末端补平等，也用于复杂模板， 高GC/AT 模板的扩增。
使用建议：（Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平末端，无3´端"A"突出， 除使用澳门·威斯尼斯网站PCR一步定向克隆试剂盒（Cat. No: HKNR001）外， 其它PCR 产物的克隆方案有：）
1）PCR前引物进行5´端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平末端的载体中。
2）将产物3´末端加A后再与T载体连接。
3）由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3´端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度，理想的引物长度为20～30mers。另外为了减少由3´→5´外切酶活性引起的引物降解，尽量在冰上配制反应体系，并最后加入Fast Pfu DNA聚合酶。
应用实例：图例一）50μL 扩增体系中，λDNA 为模板，扩增 1kb~20kb 片段。
泳道 M：λ/Hind III DNA Marker；
泳道 1：1kb；
泳道 2：2kb；
泳道 3：4kb；
泳道 4：6kb；
泳道 5：8kb；
泳道 6：10kb；
泳道7：12kb；
泳道 8：20kb
保存温度：-20℃。
产品包装（A 包装）：
活性定义：在74℃条件下，30 分钟内催化 10nmol dNTPs 掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。。
常用反应体系（50μL）：
常用PCR 循环：
注意事项：
1)对高 GC 含量模板，建议将变性温度提高到 98℃。
2)对于高 GC 模板，建议配套使用 PCR 增强剂 I（Cat. No: HKE050）和 PCR 增强剂 II（Cat. No: HKE051），或者添加终浓度为 5%-8% DMSO。
