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NGS mRNA Magnetic Isolation Kit（NGS mRNA 磁珠分离试剂盒）
编号：HKE242
规格：12次（48次）
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028599 CVT琼脂培养基 250g/瓶
编号：028599
规格：250g/瓶
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DMEM，低糖，含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，含丙酮酸钠
编号：XB01-08
规格：500mL/瓶
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铜绿假单胞菌定量质控菌株QS009B
编号：QS009B
规格：(0.6-2.0)×10^7 CFU/瓶
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不锈钢过滤系统 MFS-6A-DN-K(适配塑料滤杯)
编号：180011641
规格：MFS-6A-DN-K(六联、适配φ47mm塑料滤杯、含真空泵SZKB-6BS)
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HKE377 NLS-Cas9(H840A) Nickase（内切酶）
编号：HKE377
规格：50μg/盒
产品名称：NGS mRNA Magnetic Isolation Kit
产品编号与包装规格：
| 编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 价格 |
| HKE242A | NGS mRNA Magnetic Isolation Kit | 12次 | NGS mRNA 磁珠分离试剂盒 | 330 |
| HKE242B | 48次 | 1169 |
产品概述：NGS mRNA Magnetic Isolation Kit 是从总 RNA 中提取 mRNA 的试剂盒，该技术基于 Oligo-dT25 与链霉亲和素磁珠偶联，然后将其作为结合 poly(A)-mRNA 的固相支持物来分离 mRNA。该试剂盒可应用于 RNA-Seq、 cDNA合成及体外翻译等。
产品特点：
1、本试剂盒根据磁珠法提取 mRNA，操作简便，无需离心。
2、分离出的 mRNA 最后用少量洗脱缓冲液溶解，可直接进行后续实验，无需再经 RNA 沉淀纯化。
3、本试剂盒可适用于（10ng-5μg）RNA 样本，mRNA 回收产率为总 RNA 含量的 1％-2％。
4、本试剂盒可在 30 分钟内从总 RNA 中获得完整的 mRNA，省时高效。
保存条件：Oligo-dT25 Mag Beads 4℃保存，除磁珠外其他缓冲液均-20℃保存。
NGS mRNA Magnetic Isolation Kit 产品组成：
| A 包装（12 次） | B 包装（48 次） | |
| Oligo-dT25 Mag Beads | 200μl | 800μl |
| Binding Buffer(2×) | 3ml | 12ml |
| Wash Buffer | 8ml | 30ml |
| Elution Buffer | 300μl | 1.2ml |
| RNase Free Water | 1ml | 1ml×2 |
操作步骤：冰盒、0.2ml 磁力架、0.2ml/1.5ml Nuclease-free 管、65℃水浴锅、PCR仪等实验前准备材料。
1、将 Oligo-dT25 Mag Beads 从 4℃取出，静置使其温度平衡至室温（约 30 min）。
2、将磁珠充分混匀，吸取 15μl 到 Nuclease-free PCR 管中，置于磁力架中，室温静置 30s，小心移除上清。
3、加入 100μl 2×Binding Buffer 洗涤磁珠，轻轻混匀，置于磁力架中，室温静置 1min，小心移除上清。
4、重复步骤 3。
5、加入 50μl 2×Binding Buffer 重悬磁珠。
6、在一个 Nuclease-free PCR 管中，用 RNase free water 将 0.1-5 μg 总 RNA 稀释至 50 μl，65℃温育 5min。
7、立即将步骤 5 中的悬浮液加入到步骤 6 的 RNA 中，轻轻混匀，室温静置 10min 以上，使其温度降至室温。（此步骤 mRNA 与磁珠结合）
8、将样品置于磁力架中，室温静置 2 min，小心移除上清。
9、加入 200μl Wash Buffer，轻轻混匀，将样品重新放回至磁力架中，室温静置 1min，小心移除上清。
10、重复步骤 9 两次，最后吸除全部上清。
注：最后需要用 10μl 移液器吸干净残留液体。
11、加入 21μl Elution Buffer，混匀后将样品放入 PCR 仪中，80℃，2min；待温度降至 25℃后取出，立即置于磁力架中，室温静置 2min，收集 20μl 上清。（此步骤 mRNA 与磁珠分离）
注：样品可置于冰上继续进行 NGS 文库构建或其他分析应用，也可以置于-80℃保存。
注意事项：
1） 磁珠需置于 4℃保存。
2） 磁珠使用前务必要回温至室温，并充分混匀，否则可能影响样品的回收效率。
3） 操作过程严格保证无 RNase 和核酸污染。
4） 为获得好的纯化效果，提取的总 RNA 完整度应良好，确保 RIN 值在 7.0 及以上。
