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sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit（sgRNA 筛选及基因型确认试剂盒）
编号：HKE370
规格：30次
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规格：500mL/瓶
产品名称：sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit
中文名称：sgRNA 筛选及基因型确认试剂盒
产品编号与包装规格：
| 编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 价格 |
| HKE370 | sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit | 30次 | crispr基因编辑（筛选及基因型确认试剂盒） | 2492 |
产品描述：CRISPR/Cas9 是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免 疫防御系统。CRISPR/Cas9 系统通过将入侵噬菌体和质粒 DNA 的片段整 合到 CRISPR 序列中，并利用相应的 CRISPR RNAs（crRNAs）来指导 Cas9 蛋 白 对 同 源 序 列 的 降 解 ， 从 而 提 供 免 疫 性 。 人 工 改 造 过 的 Cas9/sgRNA 系统 通过 sgRNA（short guide RNA）引导 Cas9 蛋白识别并 剪切带有 sgRNA 靶点 的双链 DNA，可用于基因敲除和精确编辑 DNA 等 操作。
产品用途：
1)基于蛋白与 sgRNA 转染的非病毒载体 CRISPR 基因敲除；
2)基于蛋白与 sgRNA 转染的非病毒载体 CRISPR 基因敲入；
3)sgRNA 剪切靶点 DNA 的效率检测，降低体内筛选成本；
4)体外剪切靶 DNA 的特异位点；
5)DNA 编辑后基因型鉴定。
应用实例：
图例一：Cas9 Nuclease DNA 片段切割活 性检测。
带有靶位点的 DNA 片段：6100bp；
酶切后 的片段：3900bp 和 2200bp。
保存条件：-20℃保存，或-80℃长期保存。
sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit 产品包装（A 包装）：
| 组分 | 体积 |
| Cas9 Nuclease(1ug/μl) | 60μl |
| 10×Reaction Buffer | 60μl |
| 2×Amplification Mix | 1 mL |
| 1.5Kb Target DNA Control(50ng/μl) | 20μl |
| Control sgRNA(1μg/μl) | 20μl |
| RNase Free Water | 1 mL |
操作步骤：提取基因组 DNA，设计引物使用 2×Amplification Mix PCR 扩增得到含有编辑位点的目的片段后进行体外 切割。
体外切割体系（20μl）：
| 组分 | 体系 |
| 1.5Kb Target DNA Control | 200ng |
| Control sgRNA | 200ng |
| Cas9 Nuclease | 0.5-1μl |
| 10×Reaction Buffer | 2μl |
| RNase Free Water | To 20μl |
37℃ 反应 1h，70℃加热 10min 终止反应。琼脂糖凝 胶电泳检测。
相关产品：
| 产品 | 目录号 |
| Cas9(D10A) Nickase | HKE366 |
| Cas9(H840A) Nickase | HKE367 |
| Cas9(D10A,H840A) Nuclease | HKE368 |
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