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产品名称：NLS-Cas9 Nuclease
中文名称：NLS-Cas9 核酸酶
产品编号与包装规格：
| 编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 价格 |
| HKE365-01A | NLS-Cas9 Nuclease | 50μg/盒 | crispr基因编辑（核酸酶） | 1365 |
产品描述：CRISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适 应性免疫防御系统。CRISPR/Cas9系统通过将入侵噬菌体和质粒 DNA的片段整合到CRISPR序列中，并利用相应的CRISPR RNAs （crRNAs）来指导Cas9蛋白对同源序列的降解，从而提供免疫性。 人工改造过的Cas9/sgRNA系统通过sgRNA（short guide RNA）引导 Cas9蛋白识别并剪切带有sgRNA靶点的双链DNA，可用于基因敲除 和精确编辑DNA等操作。本试剂盒提供的Cas9核酸内切酶通过在蛋 白两端加了核定位信号（NLS），可使蛋白进入细胞核内进行基因 组编辑。
产品特点：纯蛋白体系，避免CRISPR基因敲除时引入质粒或病毒干扰。
产品用途：
1，基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除；
2，基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入；
3，sgRNA 剪切靶点DNA 效率检测，降低体内筛选成本；
4，体外剪切靶 DNA 的特异位点。
应用实例：图例）Cas9 Nuclease做 DNA片段切割活性检测。
带有靶位点的DNA片段为6100 bp；
酶切后的片段为3900 bp和 2200 bp。
保存温度：-20℃保存，或-80℃长期保存。
NLS-Cas9 Nuclease 产品包装（A包装）：
| 产品组成 | 体积 |
| NLS-Cas9 Nuclease（1μg/ μL） | 50 μL |
| 10×Reaction Buffer | 500 μL |
| *HKE365-02 系列为 5 μg/μL浓度，共 10μL。 | |
体外切割体系（20μL）：
| dsDNA | 200 ng |
| sgRNA | 200 ng |
| NLS-Cas9 Nuclease | 0.5-1 μg |
| 10×Reaction Buffer | 2 μL |
| RNase Free Water | 至 20 μL |
37 ℃保温 1 h、70℃保温 10 min
注：可在反应体系中添加 20U 的 RNase Inhibitor，防止 dsDNA 不纯导致 sgRNA 的降解。
相关产品：
| HKE366* | Cas9（D10A） Nickase |
| HKE367** | Cas9（H840A）Nickase |
| HKE368*** | Cas9(D10A,H840A) Nuclease |
| HKE369 | sgRNA In Vitro one-step Transcription Kit |
| HKE370 | sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit |
* 为 Cas9（D10A）Nickase，能在与 sgRNA 靶序列互补的 DNA 链上产生切口，从而形成功能性的单链断裂，可以减 少意外的脱靶基因修饰。
** 为 Cas9（H840A）Nickase，能在与 sgRNA 靶序列非互 补的DNA 链上产生切口，从而形成功能性的单链断裂，可以 减少意外的脱靶基因修饰。
*** 为 Cas9(D10A,H840A) Nuclease，具有靶DNA 结合活性， 但无切割活性，可用于阴性对照等用途。
