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Bst DNA Polymerase, Large Fragment（编号：HKE015-02B | 规格：800U ×5）
编号：HKE015-02B
规格：800U ×5
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编号：025102
规格：250g/瓶
产品名称：Bst DNA Polymerase, Large Fragment(with dNTP)
中文名称：Bst DNA聚合酶，大片段(with dNTP)
产品编号与包装规格：
| 编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 产品价格 |
| HKE015-02B | Bst DNA Polymerase, Large Fragment | 800U ×5 | Bst DNA聚合酶，大片段 |
产品描述：Bst DNA聚合酶大片段是Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分，来源于E.coli菌株。利用基因重组技术，在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。该酶具有5´→3´DNA聚合酶活性， 但不具有5´→3´外切核酸酶活性。本制品可应用于DNA测序、DNA 标记和等温DNA扩增等。
产品特点：
链置换活性强。
高灵敏度。
最佳活性温度为 65℃，恒温扩增，无需热循环仪。
产品用途：
1）富含 GC 序列的 DNA 序列测定；
2）微量（纳克量）DNA 模板的快速测序；
3）随机引物 DNA 标记；
4）双链 DNA 5'突出端补平法标记；
5）可用于等温 DNA 扩增，如环介导等温扩增（LAMP），全基因组扩增（WGA），解旋酶恒温基因扩增（HDA）等。
应用实例：图例）Bst DNA 聚合酶大片段用于LAMP 实验，以 M13 ssDNA 为模板， 以 F3/B3，FIP/BIP 为引物，65℃反应1 小时后，进行琼脂糖凝胶电泳检测。
泳道M：1kb DNA Ladder ；
泳道 1：LAMP 扩增产物。
反应体系（25μL）如下：
| 10×Bst LF Buffer | 2.5μL |
| F3/B3 | 0.2μM（终浓度） |
| FIP/BIP | 0.8μM（终浓度） |
| 甜菜碱 | 1M（终浓度） |
| dNTPs | 400μM（终浓度） |
| M13 ssDNA 模板 | 2μL |
| Bst DNA 聚合酶Large Fragment | 1μL（8U） |
| ddH2O | 至 25μL |
保存温度：-20℃。
产品包装（A 包装）：
质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE 胶检测仅可见清晰单一的目的条带，qPCR 方法检测无大肠杆菌 DNA 残留，无核酸内、外切酶污染。
活性定义：65℃条件下，30分钟内使10nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
10×反应缓冲液：200mM Tris-HCl，100mM (NH4)2SO4，500mM KCl，20mM MgSO4，1% Tween 20，pH8.8。
保存体系：50 mM KCl，10 mM Tris-HCl (pH 7.5)，1mM DTT, 0.1 mM EDTA，0.1% Triton X-100 和 50% Glycerol。
反应条件：1×反应缓冲液，65℃温浴。
热失活：80℃，10 分钟。
注意事项：
1）Bst DNA 聚合酶不具有 3´→5´外切酶活性；
2）长期贮存需加入 100μg/mL BSA 或 0.1% Triton X-100；
3）建议反应温度不要超过 70℃；
4）Bst DNA 聚合酶不能用于热循环测序或PCR。
