微生物检测冻干质控菌种黑曲霉使用说明
1、 复苏黑曲霉质控菌种前应准备适于该菌种生长的培养基和培养设备,所有操作均应在符合生物安全保护及无菌条件下进行。
2、 启开黑曲霉质控菌种前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开塑盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞,加入复苏液(购买菌株包装中提供),将黑曲霉冻干菌种(干粉)制成悬浮液,然后用无菌滴管或移液器吸取适量,移至非选择性固体培养基平板(或液体培养基)上(除特殊情况或特别推荐外),按推荐的培养条件进行培养和传代保存(详见附表“冻干菌种的复苏培养和传代保存”)。
3、 有个别冻干菌种(如弧菌属、乳杆菌属等)复苏速度较慢,可按2操作后,同时将菌悬液置推荐的培养条件培养过夜,再选用适合黑曲霉生长的选择性培养基进行分离,操作见4。
4 、培养后观察菌种的生长情况,并检查其纯度,如发现纯度不能满足要求时,应选用适合黑曲霉生长的选择性培养基进行分离,并按推荐的培养条件进行培养,培养后观察目标菌的菌落特征与生化特征,挑取典型菌落做纯培养后再使用。
5、 本品为一次性用品,开启之后不宜反复使用或保存,暂不使用时,建议4℃保藏。
6、 复苏后的菌种一般宜传代(如:斜面传代)2~3次后使用,菌种传代5次后建议弃置。
7 、黑曲霉质控菌种购买后应在保质期内使用。
注):购买后如发现菌种异常或污染等情况,请在购买之日起1个月内与我们联系。
冻干菌种黑曲霉复苏示意图:
附表 冻干质控菌种的复苏培养和传代保存
名称 | 复苏液 (包装中提供) | 复苏培养基 | 培养条件 | 保存温度 | 转接 频率 | 备注 |
大肠埃希氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌 | 脑心浸液培养基 | 营养琼脂(022020) | 24h~48h | 2~ | 一个月 |
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阪崎肠杆菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌 | ||||||
肺炎克雷伯氏菌、粘质沙雷伯氏菌 | ||||||
变形杆菌、弗氏柠檬酸杆菌 | ||||||
小肠结肠炎耶尔森氏菌 | ||||||
葡萄球菌、微球菌、马红球菌、芽胞杆菌 | ||||||
假单胞菌、气单胞菌属 | 脑心浸液培养基 | 营养琼脂(022020) | 24h~48h | 一个月 |
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荧光假单胞菌 | 脑心浸液培养基 | 营养琼脂(022020) | 25℃-30℃ 24h~48h | 一个月 |
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肠球菌、链球菌 | 脑心浸液培养基 | 血平板(024070) | 24h~48h | 2~ | 半个月 |
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李斯特氏菌 | 脑心浸液培养基 | 胰蛋白胨大豆酵母浸膏琼脂 (TSA-YE) (026020) | 24h~48h | 2~ | 一个月 |
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梭菌 | 脑心浸液培养基 | 疱肉牛肉粒肉汤(027140)或梭菌増菌肉汤(027145)或哥伦比亚血平板(CP0160) | 48h~72h厌氧培养 | 2~8℃ 厌氧环境 | 半个月 | 接种疱肉牛肉粒肉汤后加无菌液体石蜡(029110)高约1cm。 |
霍乱弧菌、拟态弧菌 | 碱性蛋白胨水 | 碱性琼脂(025040) | 24h~48h | 一个月 |
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其它弧菌(副溶血性弧菌、创伤弧菌、河流弧菌、溶藻弧菌等) | 3%NaCl碱性蛋白胨水 | 3%NaCl 营养琼脂 或3%NaCl TSA (025043) | 24h~48h | 一个月 |
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霉菌、念珠菌、酵母菌 | 沙氏葡萄糖液体培养基 | 马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)(021050) | 2d~5d | 2~ | 两个月 |
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空肠弯曲菌 | 布氏肉汤 | 血平板(024070) 42± | 42± | 2~ 微需氧 | 一周 |
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双歧杆菌 | TPY肉汤 | 双歧杆菌琼脂(027330) | 48h~72h厌氧培养 | 2~ 厌氧环境 | 一周 |
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其它乳酸菌(乳酸杆菌、乳酸杆菌亚种、嗜热乳酸链球菌) | MRS肉汤或脱脂乳溶液 | 灭菌脱脂乳或 MRS琼脂(027315) | 24h~48h | 2~ | 一周 |
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嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属 | 脑心浸液培养基 | 巧克力平板培养基 (普通)(029032) | 48h~72h 5~10%CO2环境 | 2~ 5~10%CO2 环境 | 一周 |
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军团菌 | 脑心浸液培养基 | BCYE平板 (CP0020) | 4d~7d | 2~ | 一个月 | 转接时用一次性接种环,不能使用酒精灯;如使用平板转接,培养时建议用牛皮纸或报纸包好,避免平板失水变干。 |