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细菌新型生化鉴定管使用说明
―― 071840 绿脓杆菌生化鉴定盒(5种×10次)
一)生化管的使用方法
开启西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开铝盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞(如图1)所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
二)绿脓杆菌生化鉴定盒的详细使用方法
绿脓杆菌为革兰氏阴性杆菌,氧化酶阳性,能产生绿脓菌素、液化明胶,还原硝酸盐和在42℃条件下生长的一类致病菌。
从分离培养平板上挑取可疑菌苔接种于每种微量西林瓶内。将已接种的西林瓶再套上胶塞,一般采用全加塞(如图2左两瓶所示),特殊情况在下表注明采用半加塞(如图2右两瓶所示),直立于内托的凹槽内(如图2),或放置于合适的瓶架中,于35-37℃培养箱中培养,结果观察见表1。
注意事项:
1、如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式,请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
2、明胶的凝固点在28℃左右,受运输过程的温度及震荡影响,含明胶的产品(明胶)有可能出现培养基在管壁凝固形成不规则状,此为正常现象,并非质量问题,使用前可用水浴或培养箱或其他方法温育,使培养基呈液体流动状,摆直立即可。
表1各项生化管使用说明 | ||||
产品名称 | 结果判定 | 培养时间 (小时) | 使用说明 | |
阳性 | 阴性 | |||
绿脓色素 | 产生色素 | 不产生色素 | 22-26 | 西林瓶半加塞(如图2右两瓶所示)培养后加入氯仿约15~20滴,充分振荡,阳性者氯仿提取液呈蓝色,再加入1mol/L盐酸6~10滴,振荡后静置片刻,如上层盐酸液呈粉红色或紫红色即为阳性,表示有绿脓色素存在。 |
明胶 | 4-8℃呈液态 | 4-8℃呈固态 | 24-72 | 挑取新鲜菌苔穿刺接种,西林瓶半加塞(如图2右两瓶所示)后竖立培育,培养后置4-8℃冰箱30分钟后观察结果。如果24h不液化,则继续培养到48h或72h再观察。 |
硝酸盐产气 | 倒管内有气泡 | 倒管内无气泡 | 18-24 | 使用前确定倒管内无气泡。 |
营养琼脂 | 生长 | 不生长 | 41~42℃,24~48 | 用接种针挑取新鲜菌苔,在斜面上划“之”字形接种。 |
氧化酶试剂 | 蓝紫色 | 不变色 | 30秒内 | 滴加1滴试剂到一小块洁净滤纸上,以刚刚浸湿为宜;用玻棒或接种环(铂或塑料)挑取适量新鲜菌苔涂在纸片上。 |
备注:本鉴定盒是按照澳门·威斯尼斯网站产品目录中的品种成份从左到右的顺序摆放。 |
三)绿脓杆菌的生化鉴定程序(见下图)和生化鉴定特征(见表2)